人半乳糖凝集素3檢測試劑盒（ELISA法）
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒產(chǎn)品詳情
| 中文名稱 | 人半乳糖凝集素3檢測試劑盒 | | 英文名稱 | Human Galectin-3 ELISA Kit | | 產(chǎn)品貨號 | ELH-HDF-15 | | 產(chǎn)品規(guī)格 | 96T | | 檢測樣本 | 血清，血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液 | | 適應(yīng)物種 | 人 | | 預(yù)期用途 | 可用于人血清，血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中半乳糖凝集素3的定量檢測 | | 儲(chǔ)存條件 | 2~8℃ | | 產(chǎn)品品牌 | 美國Raybiotech | | 供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒預(yù)期用途
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒可用于人血清，血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中半乳糖凝集素3的定量檢測。僅用于科研使用。
人半乳糖凝集素3ELISA試劑盒檢測原理
人半乳糖凝集素3ELISA試劑盒使用包被有人Galectin-3特異性抗體的96孔板。將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入到孔中，樣品中存在的Galectin-3通過固定的抗體與板孔結(jié)合。洗滌板孔并加入生物素化的抗人Galectin-3抗體， 洗去未結(jié)合的生物素化抗體后，將HRP-綴合的鏈霉抗生物素蛋白加入到孔中。再次沖洗板孔，向孔中加入TMB底物溶液，其與所結(jié)合的Galectin-3的量成比例地顯色。 終止液將溶液顏色從藍(lán)色變?yōu)辄S色，并且在450nm處測量吸光度。
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒組成成分
| 組分 | 表述 | 試劑預(yù)處理后保存/穩(wěn)定性 | | Galectin-3酶標(biāo)板（項(xiàng)目A） | 12*8，包被有抗人Galectin-3 | 4°C一個(gè)月 | | 濃縮洗滌液（20X）(項(xiàng)目B) | 25ml 20X濃縮液 | 4°C一個(gè)月 | | 標(biāo)準(zhǔn)蛋白（項(xiàng)目C） | 2瓶人Galectin-3。 1個(gè)小瓶足運(yùn)行每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的2個(gè)重復(fù)孔 | -80°C一周
| | 檢測抗體GDF-15（項(xiàng)目F） | 2瓶生物素化的抗人類Galectin-3。 每小瓶足以測定微板的一半。 | 4°C一天 | | HRP-鏈霉親和素濃縮液（項(xiàng)目G） | 200ul 400X濃縮HRP綴合
鏈霉親和素 | 現(xiàn)配現(xiàn)用，不能保存和再次使用 | | TMB底物液（項(xiàng)目H） | 12ml TMB 溶液 | N/A | | 終止液（項(xiàng)目I） | 8ml 0.2M硫酸 | N/A | | 測定稀釋液（項(xiàng)目E2） | 15ml 5X濃縮液 | 4°C一個(gè)月 |
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)所需材料（未提供）
1.能夠測量450 nm處吸光度的酶標(biāo)儀。
2.提供2μl至1 ml體積的精密移液管。
3.可調(diào)1-25毫升移液器用于試劑制備。
4．100毫升和1升刻度量筒。
5. 吸水紙。
6. 蒸餾水或去離子水。
7.雙對數(shù)做圖紙或計(jì)算機(jī)和軟件進(jìn)行ELISA數(shù)據(jù)分析。
8.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品或樣品稀釋液的管子。
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒檢測步驟
1、使用前將所有試劑和樣品置于室溫（18 - 25oC）。建議所有標(biāo)準(zhǔn)和樣品至少重復(fù)一次。
2、根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)標(biāo)記可拆卸的8孔條。
3、分別加入樣品和每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品100μl（參見試劑制備步驟3）到適當(dāng)?shù)陌蹇字?。蓋上蓋子，室溫溫和振蕩孵育2.5小時(shí)
4、棄去溶液，用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)洗板，每孔加入洗滌緩沖液（300μl）。每個(gè)步驟中去除液體對于良好的性能是至關(guān)重要的。洗完后，通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。
5、每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體（試劑制備步驟6）。在室溫下溫和振蕩孵育1小時(shí)。
6、棄去溶液。重復(fù)洗滌，如步驟4。
7、加入100μl制備的鏈霉親和素溶液（見試劑制備步驟7）。在室溫下溫和搖動(dòng)孵育45分鐘。
8、棄去溶液。 重復(fù)洗滌，如步驟4。
9、向每個(gè)孔中加入100μlTMB一步底物試劑（項(xiàng)目H）。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
10、向每個(gè)孔中加入50μl終止液（項(xiàng)目I）。 立即讀取450 nm處吸光度值。
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