褪黑激素試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 通用名稱：褪黑激素檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 英文名稱：Melatonin ELISA 產(chǎn)品規(guī)格：96T 預(yù)期用途： 褪黑激素試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。僅用于科研使用。 檢測原理： 利用的是競爭法的原理。生物素和非生物素標記的抗原競爭性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達到平衡后，洗板除去游離的生物素抗原，結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標記物和對硝基苯磷酸底物檢測出來。用已知的標準品數(shù)據(jù)做一條標準曲線，將未知樣品的酶活性與標準曲線進行比較就可以定量出未知樣品的量。 組成成分： 數(shù)量 | 標記 | 成分 | 1×12×8 | MTP | 微孔板，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。 | 3×2ml | BIOTIN LYO | 褪黑激素生物素，凍干，內(nèi)含穩(wěn)定劑。 | 3×2ml | ANTISERUM LYO | 褪黑激素抗血清，凍干粉，內(nèi)含抗血清（兔，多克?。┖头€(wěn)定劑。 | 1×250ul | ENZCONJ CONC | 酶聯(lián)物，80倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體（羊）、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。 | 1×6×2ml | CAL A-F LYO | 標準品A-F，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，提取濃度請見試劑瓶標簽或QC質(zhì)控品。 | 1×2×2ml | CONTROL 1+2 LYO | 質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，濃度/可接受范圍請見試劑瓶標簽。 | 1×100ml | WASHBUF CONC | 洗滌液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液 | 32×13ml | PNPP SUBS | PNPP 即用 | 1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。 | 2×10 | EXTRCOL | 提取柱，即用，C18 RP，1cm3/100mg。另需提取柱可從IBL定購（編號：KEME761） | 3× | FOIL | 封板紙 |
所需材料（未提供） 1）移液器，體積：50; 500ul 2）試管（12×75mm） 3）軌道振蕩器（400-600rpm） 4）旋渦混合器 5）帶儲器的8道移液器 6）洗滌瓶，自動或半自動洗板機 7）離心機（冷凍離心機更適宜）：100-200×g，也可選用多頭抽真空裝置（例如：Mallinekrodt-Baker 或Waters）。 8）甲醇（HPLC級） 9）蒸發(fā)離心機 10）可在405nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長600-650nm） 11）蒸餾水或去離子水 12）吸水紙、取樣吸頭和計時器 儲存條件： 必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時,試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用4次。 樣本要求： 血清，血漿（EDTA，肝素） 按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當在實驗開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。 | 儲存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | ≤-70℃ | 避免太陽直射，避免反復凍融。 | 穩(wěn)定性 | 24小時 | 3個月 | 1年 |
檢測方法： 注意 | 用于96人份檢測色試劑盒成分可分成3次進行。下列所述體積為檢測32人份時所需要的量。 |
凍干或濃縮成分的準備： 稀釋/溶解 | 成分 | | 稀釋劑 | 比例 | 備注 | 儲存 | 穩(wěn)定性 | 15ml | 洗滌液 | 150ml | 雙蒸水 | 1：10 | | 2-8℃ | 8周 | | 標準品和質(zhì)控品 | 2.0ml | 雙蒸水 | | 靜置15min，混合時避免氣泡 | ≤-20℃ | 直至有效期 | | 褪黑激素生物素 | 2.0ml | 已稀釋的洗滌液 | | 靜置15min，混合時避免氣泡 | 臨時配置,只能使用一次 | | 褪黑激素抗血清 | 2.0ml | 蒸餾水 | | 靜置15min，混合時避免氣泡 | 70ul | 酶聯(lián)物 | 5.6ml | 已稀釋的洗滌液 | 1:81 | | 10ml | 未稀釋甲醇 | 100ml | 蒸餾水 | 10%(v/v) | |
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