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胰島素（大鼠）elisa檢測(cè)試劑盒

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洗滌緩沖液1X溶液的制備

用蒸餾水稀釋洗滌緩沖液21 X，制備所需體積的洗滌緩沖液

1 + 20根據(jù)下表。輕輕混合。

洗滌緩沖液21 ×再蒸餾水

10碟2瓶8 000 mL

5板180 mL 3600 mL

3板110 mL 2200 mL

2個(gè)盤子70毫升1400毫升

1板35ml 700ml

稀釋后儲(chǔ)存：2°C至8°C保存8周。

標(biāo)本收集和處理

血清樣本

靜脈穿刺采血，使其凝固，離心分離血清。

樣品可在2°C - 8°C保存24小時(shí)。

在-20°C保存較長(zhǎng)的時(shí)間。避免反復(fù)凍融。

血漿樣本

通過(guò)靜脈穿刺收集血液到含有肝素或EDTA抗凝劑的管道中，并分離血漿部分。

樣品可在2°C - 8°C保存24小時(shí)。

在-20°C保存較長(zhǎng)的時(shí)間。避免反復(fù)凍融。

樣品制備

但含&gt；5.5µg/L的樣品，用Calibrator 0稀釋1/ 10v /v即可。

注意!緩沖液不能用于樣品稀釋。

測(cè)試程序

為每次試驗(yàn)運(yùn)行準(zhǔn)備校準(zhǔn)品曲線。所有試劑和樣品在使用前必須放在室溫下。

1. 制備酶結(jié)合物1X溶液（參照上頁(yè)表格）和洗滌液1X溶液。

2. 準(zhǔn)備足夠的微孔板孔，以容納校準(zhǔn)器和樣品的副本。

3. 移液器10µL將校準(zhǔn)品和樣品各放入適當(dāng)?shù)目字小?/span>

4. 每孔加入100µL酶結(jié)合物1X溶液。

5. 在搖板上（700-900 rpm）在室溫（18℃- 25℃）下孵育2小時(shí)。

6. 每孔用700µL洗滌緩沖液1X溶液洗滌6次，使用帶溢洗的自動(dòng)洗板機(jī)功能，最后洗凈后，將盤子倒置，輕輕敲在吸水紙上。洗滌中不包括浸泡過(guò)程。或手動(dòng),借由將微孔板倒置于洗滌槽上丟棄反應(yīng)體積。每孔加入350µL洗滌液。丟棄將洗滌液在吸水紙上敲幾下，以去除多余的液體。重復(fù)5次。避免在洗滌過(guò)程中延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。

7. 每孔加入200µL Substrate TMB。

8. 在室溫下（18℃- 25℃）孵育15分鐘。

9. 每孔加入50µL停止液。將盤子放在激振器上大約5秒，以確保混合。

10. 讀取450 nm光密度并計(jì)算結(jié)果。30分鐘內(nèi)閱讀。

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