軍團(tuán)菌抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
（美國(guó)DRG*：貨號(hào)，EIA2814；規(guī)格，96T）
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1、適用范圍
作為一種輔助手段用于定性檢測(cè)人血清中軍團(tuán)菌總抗，屬于體外診斷試劑。在美國(guó)僅用于科研。
2、實(shí)驗(yàn)原理
微孔板中包被著激活的軍團(tuán)菌抗原，實(shí)驗(yàn)過(guò)程包含三步
- 待測(cè)血清在包被板中的反應(yīng)。血清中特異性抗體可與包被板中的抗 原結(jié)合，洗板除去未結(jié)合樣品。
- 加入酶聯(lián)羊抗人IgA/M/G，酶聯(lián)物可與上步中結(jié)合到包被板的抗體反應(yīng)，洗板。
- 底物液顯色反應(yīng)，通過(guò)顏色變化，可判斷其抗體的含量。
3、試劑組成
| 名稱 | 規(guī)格 |
| 微孔條 | 包被軍團(tuán)菌抗原（1-6組） 12 X 8孔 |
| 酶聯(lián)物 | 1×15ml/瓶標(biāo)記有HRP羊抗人軍團(tuán)菌IgG/M/A抗體白色蓋子 |
| 陽(yáng)性質(zhì)控 | 1×0.35ml/瓶 紅色蓋子 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 1×0.5ml/瓶 藍(lán)色蓋子 |
| 陰性質(zhì)控 | 1×0.35ml/瓶 綠色蓋子 |
| 樣品稀釋液 | 1×30ml/瓶 |
| 底物顯色液 | 1×15ml/瓶含TMB |
| 濃縮洗滌液（10X） | 1×100ml/瓶 |
| 終止液 | 1×15ml/瓶1M的硫酸 |
4、試劑儲(chǔ)存保存于2-8℃，稀釋后的洗滌液可在室溫保存一周
5、樣品收集和準(zhǔn)備靜脈穿刺取血，避免交叉感染，禁止使用溶血，污染血液樣品。血液樣品在室溫下不得超過(guò)8小時(shí)，2-8℃保存不得超過(guò)48小時(shí)，如需保存更長(zhǎng)時(shí)間需在-20℃或者更低的溫度下凍存。
6、實(shí)驗(yàn)所需材料儀器但本試劑盒未提供酶標(biāo)儀
微量移液管10ul和200ul
多通道移液器（50-200ul）
去離子水
塑料洗瓶
加樣槍頭
量筒
紙巾
7、實(shí)驗(yàn)步驟（1）、將試劑盒內(nèi)各成份平衡至室溫。
（2）、確定所需的微孔條將其固定在板架上。（1個(gè)空白孔，1個(gè)陰性質(zhì)控孔，3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控孔）
（3）、按照1：21對(duì)樣品，陰性質(zhì)控，標(biāo)準(zhǔn)，陽(yáng)性質(zhì)控進(jìn)行稀釋（10ml血清+200ml的樣品稀釋液）
（4）、加入100ul樣品稀釋液于A1孔作為空白孔，每孔分別加入100ul稀釋后
的質(zhì)控，標(biāo)準(zhǔn)及樣品。
（6）、室溫（20-25℃）反應(yīng)25±5分鐘
（7）、洗板5次
（8）、每孔加入100ul的酶聯(lián)物
（9）、室溫（20-25℃）反應(yīng)25±5分鐘
（10）、洗板5次
（11）、每孔加入100ul的底物液
（12）、室溫下反應(yīng)10-15分鐘
（13）、每孔加入50ul終止液
（14）、30分鐘內(nèi)酶標(biāo)儀讀數(shù)
觀察結(jié)果，或者在450nm/620-650nm處讀數(shù)
注意：洗滌時(shí)要反復(fù)洗滌五次8、結(jié)果說(shuō)明CUTOFF OD值=參比品OD x 相關(guān)因子（CF）
CF值在每個(gè)試劑盒上注明。
陰性樣品：樣本OD/CUTOFF OD ≤ 0.90
灰色區(qū)域：0.91<樣本OD/CUTOFF OD<1.09
陽(yáng)性樣品：樣本OD/CUTOFF OD≥ 1.10
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