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ELISA試劑盒測定具體的做法
我們建議在臨床ELISA試劑盒測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應(yīng)時間的條件。將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實(shí)驗室中,ELISA試劑盒很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實(shí)際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。  
曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,ELISA試劑盒在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,ELISA試劑盒測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的1ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。  
因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實(shí)驗室可自行確定本實(shí)驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃,從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。ELISA試劑盒作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。
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